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谷草转氨酶GOT活性检测试剂盒可见 [复制链接]

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北京中科白癜风医院科学大讲堂 http://www.xxzywj.com/m/index.html

谷草转氨酶(GOT)活性检测试剂盒(可见分光光度法)

注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

产品货号:BA

产品规格:50管/24样

产品简介:

GOT(2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。

GOT催化α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。

产品内容:

提取液:液体30mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体50mL×1瓶,4℃保存。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样品测定的准备

1.细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(个):提取液体积(mL)为~:1的比例(建议万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或W,超声3s,间隔10s,重复30次);g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2.血清(浆)样品:直接检测。

二、测定操作表

1.分光光度计预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。

2.在EP管中加入下列试剂:

三、计算:

1.以相对吸光值(A测定管-A对照管)为横坐标,相应酶活力单位(U/L)为纵坐标。

作标准曲线为:y=(.07χ2+.86χ+0.)×0.

2.血清中GOT活力(U/L)=0.×(.07χ2+.86χ+0.)。

χ为A测定管-A对照管。

3.微生物、细胞或组织中GOT活力(U/g蛋白)=0.×(.07χ2+.86χ+0.)÷待测匀浆蛋白浓度(g/L)。

χ为A测定管-A对照管。

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