蛋白质羰基含量检测试剂盒（货号：AKAO）
蛋白质羰基是由氨基酸残基侧链中的氨基或亚氨基受到自由基攻击后转变而来，在体内主要通过金属离子催化氧化系统形成，是多种氨基酸在蛋白质氧化修饰过程中的早期标志。羰基化蛋白极易相互交联、聚集为大分子从而降低或失去原有蛋白质的功能，其含量能够反应蛋白质氧化损伤的程度，可作为衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
蛋白质羰基能够与2,4-二硝基苯肼反应生成红色2,4-二硝基苯腙沉淀，产物在nm处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可定量检测蛋白质羰基的含量。
蛋白质羰基含量检测原理
需自备试剂：乙酸乙酯（CHO，MW=88.10，CAS:-78-6）；无水乙醇（CHO，MW=46.07，CAS:64-17-5）
测定过程中所需要的仪器和试剂：紫外分光光度计、1mL石英比色皿（光径1cm）、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱、乙酸乙酯、无水乙醇和蒸馏水。
1.样本处理（可根据预实验结果适当调整样本量和比例）
①组织：按照组织质量（g）：提取液A体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液A）处理样品，冰浴匀浆，4℃rpm离心10min，取全部上清至离心管中，加入0.1mL提取液B，室温静置10min，4℃rpm离心10min，取上清即为待测样本，置于冰上待测。
②细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（10个）：提取液A体积（mL）为（-）：1的比例（建议万细菌或细胞加入1mL提取液A）处理样品，冰浴超声破碎（功率W，超声3s，间隔7s，总时间3min），4℃rpm离心10min，取上清即为待测样本，置于冰上待测。
③血清、培养液等液体样本：直接测定或适当稀释后再进行测定。
吸光值测定：将上清液置于1mL石英比色皿，测定nm处吸光值，记为A测定和A对照，计算ΔA测定=A测定-A对照。注：每个样品均需设一个对照管。
注意事项
①提取液B应根据使用量现用现配，配置后置于4℃保存，若变为黑色则停止使用；
②试剂一见光易分解，反应过程需在避光条件下进行；
③试剂四为沉淀洗涤液，需重复加入三次对沉淀进行洗涤；
④为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.
