北京关于治疗白癜风医院 http://www.bdfyy999.com/m/吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性检测试剂盒（货号：AKPL）
一、产品描述
吲哚乙酸（IAA）是生长素的主要存在形式，参与植物体内诸多生理活动，具有促进种子萌发、扦插生根和诱导花芽分化等重要生理作用，吲哚乙酸氧化酶（IAAO）可将吲哚乙酸氧化从而使其失去活性，其活性高低对调节体内吲哚乙酸的水平起着重要作用。
吲哚乙酸在酸性条件下能够与FeCl3反应生成红色产物，产物在nm处具有最大吸收峰，通过测定吲哚乙酸的消耗速率即可表征吲哚乙酸氧化酶的活性。
吲哚乙酸氧化酶检测原理
1.粗酶液制备（可根据预实验结果适当调整样本量）
①组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃g离心15min，取上清液置于冰上待测。
②细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（个）：提取液体积（mL）为（-）：1的比例（建议万细菌或细胞加入1mL提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功率20%，超声3s，间隔10s，重复30次），4℃g离心15min，取上清液置于冰上待测。
2.测定步骤
①分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
吸光值测定：测定nm处吸光值，记为A测定、A对照、A标准和A空白；计算A测定=A对照-A测定，A标准=A标准-A空白。注：空白管只需测定1-2次，每组样品均需设一个对照管。
标准曲线的建立：以0.2、0.1、0.05、0.、0.μmol/mL为横坐标（x），以其对应的A标准为纵坐标（y），绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将A测定带入公式中得到x（μmol/mL）。
四、注意事项
①若ΔA大于0.5或A对照大于1.0时，建议将粗酶液使用提取液适当稀释后再进行测定；ΔA过小时，可增加酶促反应时间或增加粗酶液添加量后再进行测定，计算时相应修改；样本处理等过程均需要在冰上进行；
②试剂二具有毒性，实验过程中，需做好防护措施；
③为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.
