GB.30-英文版食品安全国家标准食品营养强化剂多聚果糖
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1范围
本标准适用于以菊苣或菊芋根为原料，采用酸／碱处理或其他方式去除杂质，使用干燥等工艺制得的食品营养强化剂多聚果糖。
2分子式和结构式
2.1分子式
(C6－H12－O6)－(C6－H10－O5)n-2－(C6－H10－O5)(n＝5～60)
2.2结构式
多聚果糖是果糖单元通过β-2，1-键联接而成并以葡萄糖单元终止的单元总数为5～60的碳水化合物。
3技术要求
3.1感官要求
感官要求应符合表1的规定
附录A
检验方法
多聚果糖(≥DP5)、平均聚合度(DP)、葡萄糖＋果糖＋蔗糖含量的测定
A.1一般规定
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB／T中规定的一级水。所用溶液除另有说明外，均为水溶液。
A.2试剂和材料
A.2.1乙酸：0.2mol／L。
A.2.2乙酸钠：0.2mol／L。
A.2.3pH4.5乙酸缓冲液：取0.2mol／L乙酸28.0mL、0.2mol／L乙酸钠22.0mL混合，用水稀释至mL。
A.2.4盐酸溶液：0.05mol／L。
A.2.5氢氧化钾溶液：0.05mol／L。
A.2.6淀粉葡萄糖苷酶：用于将淀粉酶解为葡萄糖，其中葡萄糖、果糖和蔗糖含量应小于0.02％，不用时4℃冰箱保存。
A.2.7果糖酶：用于将多聚果糖酶解为葡萄糖和果糖，其中葡萄糖、果糖和蔗糖含量应小于0.％，不用时4℃冰箱保存。
A.2.8乙腈。
A.2.9葡萄糖：d(＋)无水葡萄糖。
A.2.10果糖：右旋果糖。
A.2.11蔗糖。
A.2.12糖标准储备液：分别称取经96℃±2℃干燥4h后的糖标准品共6.00g(其中葡萄糖、果糖和蔗糖各2.00g)一起放入50mL烧杯中，加水并搅拌使之完全溶解，转入50mL容量瓶中定容至刻度，得糖标准储备液(其中葡萄糖含量为40.0mg／mL、果糖含量为40.0mg／mL、蔗糖含量为40.0mg／mL)。
A.2.13标准工作液：将糖标准储备液分别用水稀释至10.0mg／mL、7.00mg／mL、4.00mg／mL、2.00mg／mL和1.00mg／mL的溶液。
A.3仪器和设备
A.3.1分析天平，感量为1mg和0.01g。
A.3.2pH计：精确度±0.05。
A.3.3恒温水浴锅。
A.3.4高效液相色谱仪(带示差折光或同等性能的检测器)。
A.3.50.22μm微孔滤膜。
A.3.6烘箱。
A.3.mL、50mL容量瓶。
A.3.8移液器(1mL、5mL、10mL)。
A.4分析步骤
A.4.1样品称取
称取经96℃±2℃干燥4h的约1g样品(精确至1mg，质量m1)，放入mL烧杯中，加入50mL沸水，适度搅拌，用氢氧化钾溶液(A.2.5)或盐酸溶液(A.2.4)调节pH至6.5～8.0。在样品溶解完全后，移入mL容量瓶，于85℃±2℃保温10min。然后冷至室温，用水定容并摇匀，此后注意保持样品温度在室温以上。取少量溶液经0.22μm滤膜过滤后进行分析(检测A0)。
A.4.2酶水解1
取60.0mL的样品液(A.4.1)，加入30.0mL的乙酸缓冲液(A.2.3)均匀混合，用0.05mol／L盐酸溶液(A.2.4)调至pH＝4.5±0.05。加入足够量的淀粉葡萄糖苷酶(A.2.6)[如果不能确定样品中淀粉和麦芽糊精的大致含量，可认为样品中未知部分％为淀粉，以此计算酶的用量]，将样品液水浴升温至60℃±2℃，保持恒温30min，适度搅拌但不应起沫。溶液中不应有空气泡。冷至室温后转至mL容量瓶，用水定容，取少量溶液经0.22μm滤膜过滤后分析(检测A1)。
A.4.3酶水解2
取60.0mL的样品液(A.4.2)，加入足够量的果糖酶(A.2.7)(如果不能确定多聚果糖含量，可认为样品未知部分为％多聚果糖，如使用megazymeU／mL的混合果糖酶，加入μL)。将样品液水浴升温至60℃±2℃，保持恒温30min，适度搅拌，防止产生泡沫，防止空气进入。冷至室温后转至mL容量瓶，用水定容，经0.22μm滤膜过滤后分析(检测A2)。
A.5色谱检测
参考色谱条件：氨基柱或同等性能的色谱柱，流动相为乙腈：水＝75％：25％。流速1.0mL／min，进样量20μL；柱温30℃。
标准曲线的绘制：分别吸取20μL标准工作液(A.2.13)注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定标准溶液的峰高或峰面积，以浓度为横坐标、峰高或峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
样品中糖的测定：吸取20μL样液(检测A0、A1和A2)注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试样的峰高或峰面积，由标准曲线上查得样液中果糖、葡萄糖、蔗糖的含量。试样溶液中果糖、葡萄糖、蔗糖的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应改变取样量后重新检测。
A.6结果计算
A.6.1果糖、葡萄糖和蔗糖含量的计算
不同检测所对应的糖含量见表A.1。
附录B
检验方法
低聚果糖(DP3-DP4)含量的测定
B.1一般规定
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB／T中规定的一级水。所用溶液除另有说明外，均为水溶液。
B.2试剂和材料
B.2.1乙腈。
B.2.2蔗果三糖(含量≥99％)。
B.2.3蔗果四糖(含量≥99％)。
B.2.4糖标准储备液：分别称取经96℃±2℃干燥4h后的糖标准品各1.g(蔗果三糖和蔗果四糖)放入50mL容量瓶中，加水搅拌使之完全溶解，定容至刻度，得20mg／mL标准储备液。
B.2.5工作标准液：根据检测器的不同将糖标准储备液分别用水稀释至如下浓度的溶液：
a)示差折光检测器：2.50mg／mL、2.00mg／mL、1.50mg／mL、1.00mg／mL和0.50mg／mL。
b)蒸发光散射检测器：2.00mg／mL、1.00mg／mL、0.50mg／mL、0.20mg／mL和0.08mg／mL。
B.3仪器和设备
B.3.1高效液相色谱仪(具有蒸发光散射或示差折光检测器)。
B.3.2分析天平，感量0.1mg。
B.3.30.22μm微孔滤膜。
B.3.4mL容量瓶。
B.4分析步骤
称取经96℃±2℃干燥4h的约1g样品(精确至1mg，质量m2)放入mL烧杯中，加水搅拌使之完全溶解，移入mL容量瓶，用水定容至刻度，经0.22μm微孔滤膜过滤后进样。
B.5色谱检测
参考色谱条件：氨基柱或同等性能的色谱柱；流速1.0mL／min；进样量20μL；柱温30℃；
根据检测器的不同参考流动相如下：
a)示差折光检测器：乙腈：水＝75％：25％；
b)蒸发光散射检测器：乙腈：水梯度洗脱，乙腈浓度30min内从78％降至20％。
按上述的色谱条件，取B.4中滤液进样，得到试样溶液的峰高或峰面积，然后从标准曲线上查得试样溶液中蔗果三糖或蔗果四糖的含量。试样溶液中蔗果三糖或蔗果四糖的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应改变取样量后重新检测。
B.6计算
样品中低聚果糖(DP3-DP4)的含量按式(B.1)计算。
GB.30-英文版bzfyw.