5.同一试管中，加入1mL氯仿，如步骤4所述再次离心。
6.将凝胶栓上部的水相转移至2个已经加入50μL乙酸钠(3mol/L,pH6.0)的微量离心管中，每份uL。使用pH6.0而不是pH5.2的乙酸钠，这是很少见的。
裂解缓冲液中EDTA浓度高达mmo/L，在很低的pH下极易沉淀，避免这一问题的办法在于保持pH6.0,并且在进行步骤6和7时要动作迅速。另外，裂解级冲液中的EDTA浓度可以减至20mmo/L,但是这样有可能不足以整合样品中的Mg*，使DNA易受到DNase的降解。
7.室温下，每管中加入2倍体积的乙醇(0.9mL),迅速颠倒混匀，室温下立即用最大速度离心5min。50分子克隆实验指南(原书第四版)
8.用70%的乙醇洗涤，离心沉淀。抽吸除去乙醇溶液，敞开管口置于架子上直至剩余的乙醇挥发干净。
9.将DNA溶解于μL的TE(pH8.0)，4C轻柔振荡过夜。DNA产量通常为10μg/mm鼠尾。
准备用于裂解的酵母细胞。平板培养的酵母克隆
i.用无菌接种环将-一个或几个大的、新鲜培养的克隆转移到加有50μLSTES缓冲液的微量离心管中。液体培养的酵母
i.将过夜培养的1.5mL酵母细胞转移到离心管。
ii.室温下在以最大速度离心lmin,收集沉淀下来的细胞。
ili.吸去培养介质，将细胞重悬于50μLSTES缓冲液中。
2.每个离心管中加入50μL酸洗过的玻璃珠。每管加入20μLTE(pH7.6)。