栢晖生物在后台收到有朋友咨询入册检测植物里的多糖和可溶性糖，那么这次我们就给大家梳理一下如何通过蒽酮比色法测定这两个指标。
一、实验试剂
所有试剂除注明者外，均为分析纯。
1.1蒽酮乙酸乙酯试剂：称取蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解；
1.2浓硫酸（比重1.84）；
1.3蔗糖标液：称取0.1g蔗糖溶解并定容至1L蒸馏水中，得到ug/ml标液。
二、实验仪器
分光光度计、恒温水浴锅、电子天平、烘箱、刻度离心管、带塞试管、漏斗等。
三、试样的制备
取风干的实验室待测样品充分混匀后，按四分法缩减至g，粉碎，籽粒全部通过目筛，装入样品瓶备用。
四、分析步骤
4.1样品提取
称取mg样品倒入10ml刻度离心管内加入10ml80%乙醇，至于80℃水浴中不断搅拌30min，离心，收集上清液，其残渣加10ml80%乙醇重复提2次，合并上清液。80%乙醇定容至ml，过滤后取滤液测定。
4.2制作标准曲线
取20ml刻度试管6支，从0～5分别编号，按下表加入溶液和水。
然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
4.3显色测定
测定：取植物提取液代替标准蔗糖溶液，按上述步骤进行蔗糖含量的测定，读取OD值，从标准曲线得到提取液总的蔗糖含量，然后再行计算样品中的可溶性总糖含量。
五、结果计算
可溶性总糖含量（%）=×%
式中：
a——由计算所得还原糖含量，ug；
V总——样品提取液总体积，ml；
n——为样品提取液稀释倍数
V测——显色测定时吸取样品液体积，ml；
m——样品质量，g；
——ug换算成g。
多糖含量=可溶性总糖-蔗糖-果糖
来源：成都栢晖生物整理