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TUhjnbcbe - 2025/1/20 16:45:00
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单胺氧化酶monoamineoxidase又称单胺:氧氧化还原酶(脱氨);MAO;E.C.1.4.3.4。单胺氧化酶是一种具有多个结合部位的单一分子酶,对底物的特异性不高,可使多种胺类氧化脱氨。单胺氧化酶含有铜离子,分布在肝、肾等组织的线粒体中,其含量依次为肝、心、肾、脑、肺、骨骼肌,血小板和胎盘中也含有单胺氧化酶。单胺氧化酶参与胶原纤维的生成,因此一些纤维化疾病时该酶往往升高。测定血清中酶活性可以反映其在结缔组织中的活性,从而了解组织纤维化的程度。

一、概况

1.反应式

最适pH值为9.5~9.8(若其pH值幅度超过7~10.5范围,则此酶仅表现出50%的活性)。

2.米氏常数

3.专一性

这类酶对底物的选择性较宽,它能催化氧化伯胺、仲胺与叔胺,色胺衍生物以及儿茶酚胺之类。由人胰脏来源的单胺氧化酶仅作用于伯胺,并发现其反应活性随伯胺的链长增加而相应增高。

4.抑制剂

肼与重金属离子皆有抑制作用。

5.所需纯度

此酶在市场上尚未列于试剂供应。

6.意义

单胺氧化酶广泛分布于各种动物组织中,主要集中于细胞内线粒体的碎片中。患有坏死后的与营养性的肝硬化或迁移性肝癌病人,其血清中此酶水平增高。患急性肝炎病例中,此酶水平未见增高,患纤维性病变时,则此酶水平增高。说明此酶能促使纤维性结缔组织的成熟。

二、测定方法

1.分光光度法

推荐分光光度法测定单胺氧化酶(MAO),既可依据过氧物酶存在下使过氧化物与邻-联(二)茴香胺反应而生成棕色化合物(入最大为nm),也可用比色法测定所生成的氨。然而,大多数文献皆趋向于使用荧光法测定单胺氧化酶,它能检出单个细胞内极其微量的单胺氧化酶。

还可以采用单胺氧化酶(MAO)催化单胺类底物脱氨生成相应的醛,进一步氧化成酸,底物在nm处有特征吸收峰,通过测定nm处光吸收下降的速率,可计算MAO活性。

2.荧光法

各种方法中最灵敏的方法是以色胺转化为吲哚乙醛的原理,然后再通过与醛脱氢酶(E.C.1.2.1.3)及NAD偶反成哚乙酸;

于激发波长nm与发射波长nm处测量荧光度,此法测定的灵敏度对于分析各种微量生物组织是行之有效的,适用于各种神经突触与神经节、血管以及不同部位脑组织的分析测定。

一种测定NAD的荧光法,此方法适用于各种单胺类底物(包括儿茶酚胺)的测定。

发展的荧光法,系采用犬尿胺代替色胺底物,然后,于激发波长nm或发射波长nm处测量氧化产物4-羟基喹啉的含量。

一种测定单胺氧化酶(MAO)的灵敏荧光法,即基于MAO催化氧化过程所形成的H2O氧化羟基苯乙酸变成生荧性二聚物。此法对于仅仅10单位的量可检测出。

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