谷草转氨酶(GOT)活性检测试剂盒(可见分光光度法)
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
产品货号:BA
产品规格:50管/24样
产品简介:
GOT(2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
GOT催化α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。
产品内容:
提取液:液体30mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体50mL×1瓶,4℃保存。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品测定的准备
1.细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(个):提取液体积(mL)为~:1的比例(建议万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或W,超声3s,间隔10s,重复30次);g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2.血清(浆)样品:直接检测。
二、测定操作表
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。
2.在EP管中加入下列试剂:
三、计算:
1.以相对吸光值(A测定管-A对照管)为横坐标,相应酶活力单位(U/L)为纵坐标。
作标准曲线为:y=(.07χ2+.86χ+0.)×0.
2.血清中GOT活力(U/L)=0.×(.07χ2+.86χ+0.)。
χ为A测定管-A对照管。
3.微生物、细胞或组织中GOT活力(U/g蛋白)=0.×(.07χ2+.86χ+0.)÷待测匀浆蛋白浓度(g/L)。
χ为A测定管-A对照管。